pcr引物设计

设计知识

前言：pcr引物设计的基本原则有哪些PCR引物设计的11条黄金法则 1.引物最好在模板cDNA的保守区内设计。 DNA序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的。在NCBI上搜索不同物种的同一基因，通过序列分析软件（比如DNAman）比对（Alignment），各

pcr引物设计的基本原则有哪些

PCR引物设计的11条黄金法则 1.引物最好在模板cDNA的保守区内设计。 DNA序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的。在NCBI上搜索不同物种的同一基因，通过序列分析软件（比如DNAman）比对（Alignment），各基因相同的序列就是该基因的保守区...

建议你去借分子克隆实验指南来看看，或者采用引物设计软件，比如primer premier 5，把序列输入就可以得到不同打分的引物对

NCBI有免费的设计软件 http://www.ncbi.nlm.nih.gov/tools/primer-blast/ 非常好用，权威把你的序列贴到最上方的空格就可以了，开始的时候，所有的参数都用系统的默认值就可以，不需要修改。

PCR的技术的主要步骤及PCR引物设计的一般原则分述如下： PCR的技术的主要步骤： 1、DNA变性：（90℃-96℃）：双链DNA模板在热作用下，氢键断裂，形成单链DNA。 2、退火：（60℃-65℃）：系统温度降低，引物与DNA模板结合，形成局部双链。 3、延伸：...

引物的设计一般要考虑以下几个问题： 1. 长度，至少要16bp，通常为18-30bp 2.解链温度（Tm值） 3.避免引物内部或引物之间存在互补序列（3个碱基），从而减少引物二聚体的形成以及引物内部二级结构的形成 4.G+C含量尽量控制在40%-60%之间...

引物长度一般为15-30bp，常用的为18-27bp，但不能大于38bp；引物GC含量一般为40%-60%，以45-55%为宜，上下游引物GC含量和Tm值要保持接近；引物所对应的模板序列的Tm值最好在72℃左右，至少要在55-80℃之间，Tm值曲线以选取72度附近为佳，5'到 3’...

RT-PCR引物设计原则和方法近刚开始做PCR，参考了很多与引物设计相关的帖子，结合自己使用primer5和oligo的体会，想谈谈自己设计引物的方法和步骤，恳请各位前辈指正。RT-PCR引物设计原则和方法在NCBI上搜索到该基因，找到该基因的mRNA，在CDS选...

引物的设计一般要考虑以下几个问题： 1.长度,至少要16bp,通常为18-30bp 2.解链温度（Tm值） 3.避免引物内部或引物之间存在互补序列（3个碱基）,从而减少引物二聚体的形成以及引物内部二级结构的形成 4.G+C含量尽量控制在40%-60%之间.4钟碱基的分...

PCR引物设计方法和原理一、引物设计的目的获得目标片段DNA测序基因克隆体外转录突变探针设计分子标记二、引物设计的类型常规PCR引物PCR同源引物和简并引物探针引物设计的步骤下载DNA模板或蛋白质序列进行同源比较，找到保守同源序列设计引物四、...